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cytoskeleton特色新產(chǎn)品介紹
發(fā)布時間： 2024-05-22 點(diǎn)擊次數(shù)： 1039次北京華新康信年度推廣活動 CYTOSKELETON 上海試劑 CYTOSKELETON 湖北試劑 CYTOSKELETON 10280血漿對照 CYTOSKELETON 10280血漿對照
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特色新產(chǎn)品
概述
翻譯后乙酰化發(fā)生在賴氨酸殘基的ε-氨基上，作為一種可逆且高度動態(tài)的PTM，已知其是多種細(xì)胞事件的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，包括染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄、代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)。
主要功能
首乙酰賴氨酸研究者的優(yōu)化試劑盒
分析細(xì)胞或組織樣品中內(nèi)源性或轉(zhuǎn)染蛋白的乙酰化
最完整的乙酰化蛋白質(zhì)圖譜
化學(xué)計量分析帶來更深入的機(jī)理見解
查看備受關(guān)注的Signal™Seeker工具箱的新增內(nèi)容（如下）
新格式-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒（目錄號BK163-S.15測定）
新格式-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒（目錄號BK163，30個測定）
新-信號導(dǎo)引頭乙酰賴氨酸檢測試劑盒-AAC03（目錄號BK164，30個測定）
新格式-乙酰賴氨酸親和珠（AAC0
乙酰賴氨酸親和珠-AAC04
乙酰賴氨酸親和珠（40次測定）
當(dāng)使用乙酰賴氨酸親和珠時，這種新的通用形式可以進(jìn)行更精確的控制
SigSeekGraphic2
作為Signal Seeker™產(chǎn)品線的一部分，AAC04乙酰賴氨酸親和珠經(jīng)過優(yōu)化，可檢測賴氨酸乙酰化蛋白的內(nèi)源性水平。乙酰賴氨酸親和珠的新的、通用的形式被提供為已經(jīng)與G蛋白珠化學(xué)綴合的AAC02珠（克隆7B5A1）和AAC03珠（克隆10C4B2.1）。這些珠子可以在1:1的混合物中組合以生產(chǎn)AAC04珠子，并且新的形式在研究乙酰賴氨酸PTMs時提供了很大的靈活性和準(zhǔn)確性。驗證研究表明，這些珠子可以免疫沉淀廣泛的賴氨酸乙酰化蛋白，在IP測定中，重鏈或輕鏈的可檢測浸出量最小。還提供了一種全面的Signal Seeker™乙酰賴氨酸檢測試劑盒（BK163），建議首使用。
驗證數(shù)據(jù)：乙酰賴氨酸親和珠白書
每批親和珠都經(jīng)過質(zhì)量控制，以提供高批次間的一致性，請參閱COA文件。
已驗證的應(yīng)用程序
應(yīng)用1：使用AAC02珠、AAC03珠或組合珠（AAC04珠）進(jìn)行總乙酰賴氨酸圖譜的免疫沉淀檢測——新的AAC04珠格式可以實現(xiàn)所有3種選擇
使用AAC02珠、AAC03珠和AAC04珠（50µl珠漿）對用脫乙酰酶抑制劑[TSA（1µM）和煙胺（1mM）]處理（+）或未處理（-）的Cos-7細(xì)胞的乙酰化蛋白進(jìn)行IP處理6小時。用AAC03-HRP抗體（1:3000）洗脫并通過蛋白質(zhì)印跡分析富集的乙酰化蛋白的總圖譜。使用小鼠IgG珠作為非特異性結(jié)合的對照（Cat#CIG02）。每個IP測定使用1 mg Cos-7裂解物。
應(yīng)用2：使用AAC02珠粒、AAC03珠粒或組合珠粒（AAC04珠粒）免疫沉淀靶特異性乙酰化蛋白——所有3種選擇都可以使用新的AAC04珠體形式
AAC03珠粒和AAC02珠粒（50µl珠漿）和1:1混合物（各25µl）AAC04珠粒用于脫乙酰酶抑制劑[TSA（1µM）和煙胺（1mM）]處理（+）或未處理（-）的Cos-7細(xì)胞的乙酰化蛋白IP 6小時。使用抗EGFR和抗RhoGDI抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析，并使用LiCor-Empiria軟件對信號進(jìn)行定量。還進(jìn)行IP測定，并對小鼠IgG對照珠的信號進(jìn)行定量（印跡未顯示）。每個IP使用1 mg裂解物。
應(yīng)用3：從組織樣品中免疫沉淀乙酰化蛋白
用BlastR緩沖液獲得小鼠組織提取物（肝臟和心臟）。在1mg組織提取物中使用AAC04珠粒（60μg）或mIgG對照珠粒（#CIG02，60µg）進(jìn)行IP。用SDS-PAGE分離富集的蛋白質(zhì)，并用AAC03-HRP（1:3000）進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。
bk163_問題
使用AAC04親和珠、細(xì)胞信號乙酰賴氨酸抗體和免疫化學(xué)乙酰賴氨肽親和珠富集總乙酰賴氨蛋白
使用各種乙酰賴氨酸親和試劑來IP來自用TSA（1μM）和煙胺（1mM）處理（+）或未處理（-）6小時的Cos-7細(xì)胞的乙酰化蛋白。（1） 16.7 ml AAC04珠漿（20μg抗體）。（2） 50ml AAC04珠漿（60μg抗體）。（3） 抗乙酰賴氨酸兔單克隆混合物（細(xì)胞信號，按照制造商說明1:100）。（4） ImmuneChem乙酰賴氨酸親和珠（40μg抗體）。（5） ImmunChem乙酰賴氨酸
Signal Seeker®乙酰賴氨酸檢測試劑盒-AAC03珠子（30次測定）
信號導(dǎo)引頭乙酰化檢測試劑盒-AAC03珠（30次測定，免疫沉淀形式）
藥/包裝
細(xì)節(jié)
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Signal Seeker™生產(chǎn)線的開發(fā)允許專家和非專家對關(guān)鍵的調(diào)節(jié)蛋白修飾進(jìn)行簡單分析。全面的Signal Seeker™試劑盒提供了一個親和珠系統(tǒng)，用于從任何給定的細(xì)胞或組織裂解物中分離和富集修飾蛋白。然后使用靶蛋白的一級抗體通過標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)印跡程序分析富集的蛋白質(zhì)群體。
Cytoskeley提供兩種乙酰賴氨酸檢測試劑盒，BK163和BK164。BK163是通用的試劑盒，因為它包含兩種類型的乙酰賴氨酸親和珠，AAC02珠（克隆7B5A1）和AAC03珠（克隆10C4B2.1），它們已與G蛋白珠化學(xué)偶聯(lián)。這些珠子可以以1:1的混合物組合以生產(chǎn)AAC04珠子，并且這種形式在研究乙酰賴氨酸PTM時提供了很大的靈活性和精度。驗證研究表明，這些珠子可以免疫沉淀
產(chǎn)品用途包括
調(diào)查瞬態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制
測量多途徑成員蛋白的信號事件
發(fā)現(xiàn)感興趣的蛋白質(zhì)的新修飾
深入了解監(jiān)管機(jī)制
測量內(nèi)源性或瞬時表達(dá)的蛋白質(zhì)信號事件
這些套件有許多應(yīng)用程序，我們在這里介紹了概述和有趣的示例：
Signal Seeker®試劑盒BK164僅使用AAC03親和珠，如果已確定AAC03比替代乙酰賴氨酸親和珠Cat#AAC02對POI的富集更好，則應(yīng)使用該試劑盒。
應(yīng)用1顯示了表皮生長因子受體（EGFR）和RhoGDI的IP。在該實施例中，如果研究EGFR或RhoGDI乙酰化，則建議單獨(dú)使用AAC03珠。AAC03珠粒已被證明對廣泛的乙酰化蛋白具有非常強(qiáng)的富集作用（見申請2）。
當(dāng)檢查新的乙酰化狀態(tài)時
應(yīng)用2：目標(biāo)和總乙酰化剖面的測定
使用來自試劑盒BK164的乙酰裂解物親和珠（AAC03珠）從1mg Cos-7細(xì)胞裂解物中免疫沉淀（IP）內(nèi)源性乙酰化蛋白。使用HRP標(biāo)記的泛抗乙酰基抗體（試劑盒BK164中提供），通過蛋白質(zhì)印跡檢測來分析IP的目的蛋白（POI）、EGFR和RhoGDI，或總乙酰基體。用HDAC抑制劑TSA（1uM）和煙胺（1mM）處理（+）或未處理（-）賴氨酸6小時。
試劑盒內(nèi)容
乙酰賴氨酸試劑盒包含以下成分：
裂解和蛋白質(zhì)定量步驟IP和預(yù)澄清步驟洗滌步驟洗脫步驟西方步驟
BlastR™裂解緩沖液
BlastR™稀釋緩沖液
BlastR™過濾器
蛋白酶抑制劑雞尾酒
HDAC抑制劑雞尾酒
Precision Red™蛋白質(zhì)測定試劑
乙酰賴氨酸親和珠（AAC03珠）
IP控制珠
BlastR™沖洗緩沖液
旋轉(zhuǎn)柱
珠子洗脫緩沖液
化學(xué)發(fā)光試劑A
化學(xué)發(fā)光試劑B
抗乙酰賴氨酸HRP抗體
在這一研究領(lǐng)域可以嘗試的其他實驗包括：
•參與靶蛋白調(diào)節(jié)的乙酰化酶和HDAC酶的藥理學(xué)研究。
•研究在各種不同生長因子或藥物治療下的乙酰化作用。
•檢查乙酰化靶蛋白與其下游效應(yīng)物的相互作用。
•檢查乙酰化和其他靶蛋白的PTM之間的串?dāng)_。
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